食物中碘的測定方法

1.原理 
砷鈰接觸法是利用在酸性環境中碘對亞砷酸與硫酸鈰氧化還原反應的催化作用來測定碘含量： 

2Ce+4+H3As+3O3+H2O→2Ce+3+H3As+5O4 
2Ce+4 + 2I- → 2Ce+3 + I2 
I2 + As+3 → 2I- + As+5 
由于Ce+4氧化碘離子成元素碘，然而元素碘又被As+3還原成碘離子，如此反復直至As+3、Ce+4全部消耗為止，當反應條件加以控制時，則反應速度與碘離子濃度成一定數值關系，碘離子越多反應速度越快，根據硫酸鈰的退色程度來進行比色定量分析，從而測定出碘的含量。本方法最低檢出限0.001μg。 
2.適用范圍 
適用于檢測各類食物、飼料及生物樣品中的碘含量。 
3.儀器與設備 
（1） 恒溫水浴 
（2） 馬福爐 
（3） 烤箱 
（4） 離心機 
（5） 秒表 
（6） 722分光光度計 
4.試劑 
本試驗所用試劑規格必需在分析純以上，水為無碘水或去離子水，電阻率在500萬歐姆以上。 
（1） 0.44mol/L硫酸鋅：稱取100g優級純硫酸鋅溶于少量水中，完全溶解后至于1L容量瓶中，加水稀釋至刻度。 
（2） 0.5mol/L氫氧化鈉：稱取20g優級純氫氧化鈉溶于少量水中，完全溶解后移入1L容量瓶中加水稀釋至刻度。 
（3） 2.17mol/L碳酸鉀溶液：稱取30g優級純碳酸鉀溶于少量水中，完全溶解后移入100ml容量瓶中，加水稀釋至刻度。 
（4） 0.005mol/L亞砷酸溶液：準確稱取三氧化二砷0.986g，溶于溫熱的15ml 0.5mol/L氫氧化鈉中，將此液加入850ml水中，再加入優級純濃硫酸39.6ml，濃鹽酸20ml，加熱條件下不斷攪拌直至完全溶解，冷卻后移入1L容量瓶，加水定容至1000ml。 
? 三氧化二砷的溶解性較差，如果當時不能完全溶解，可放至過夜后再定容。 
（5） 0.02mol/L硫酸鈰：稱取硫酸鈰8.087g，溶于水中，加優級純濃硫酸44ml，冷卻后加水定容至1000ml。此溶液為杏黃色。 
（6） 4.44mol/L氯化鈉：稱取優級純氯化鈉26g，溶解后定容至100ml。 
（7） 碘標準溶液： 
A) 碘標準儲備液（0.1mg/ml）：準確稱取在110℃烘至恒重的優級純碘酸鉀0.1686g，用少量水溶解后移入容量瓶，最后定容至1000ml。 
B) 碘標準中間液（1μg/ml）：吸取1ml（4.1.）溶液定容至100ml。 
C) 碘標準使用液（0.1μg/ml）：吸取1ml（4.2.）溶液定容至10ml，用時現配。 
5.操作步驟 
5.1 稱取適量樣品放入坩堝中，加入0.44mol/L硫酸鋅0.5ml，2.17mol/L碳酸鉀0.5ml混勻后放置1小時，然后至于110℃烤箱中，烤14～16小時，直至完全干燥。 
? 注意：（1）加ZnSO4和KCO3的目的是為了在灰化時起到固定碘并促進消化的作用，稱樣量較大時，硫酸鋅溶液和碳酸鉀溶液的用量可加倍；但稱樣量不宜過大，否則會造成灰化不完全。（2）在110℃條件下烘烤的目的是為了固定樣品中的碘，因此一定要控制好溫度，當溫度過高時會導致碘的升華，導致測定結果偏低。 
5.2 將坩堝置于灰化爐中550℃灰化4～8小時，灰化后的樣品必須無明顯炭粒，呈灰白色，如仍有炭粒，可加一至二滴水再于110℃烤箱中烤干后，進行第二次灰化，直至完全呈灰白色。 
? 注意：（1）一般情況下，植物樣品灰化5-6小時即可呈灰白色，而動物樣品尤其是脂肪含量較高的樣品需要灰化8小時以上方可呈灰白色。（2）灰化爐的升溫過程最好分為兩個階段：250℃ 2小時，550℃ 2-6小時 
5.3加5ml亞砷酸溶液溶解坩堝內的樣品，溶液無炭粒懸浮，并且清亮、透明，將液體移入離心管中，3000rpm離心5分鐘，取上清夜。 
? 注意：在坩堝中加入亞砷酸溶液后，要用玻璃棒不斷攪拌，使得灰化后的樣品完全溶于亞砷酸溶液中。 
5.4在6支標準系列管中依次加入0、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml碘標準使用液，相當0、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10μg碘。在樣品管中加入適量樣品液，在標準管和樣品管中分別加入亞砷酸溶液，使管中溶液總體積為5ml，然后均加入4.44mol/L氯化鈉0.5ml。 
? 注意：如果樣品碘含量過高，要用亞砷酸溶液進行一定量的稀釋，注意不要用去離子水。 
5.5將以上各管搖勻后，置于32±0.2℃恒溫水浴中，同0.02mol/L硫酸鈰溶液一并保溫10分鐘。 
5.6每隔30秒將0.5ml 0.02 mol/L硫酸鈰加入一管中，迅速搖勻，放回到32±0.2℃恒溫水浴中，在第一管加入硫酸鈰溶液15分鐘后每隔30秒比色一管，波長為410nm，比色前用水將儀器調零，讀取標準系列管和樣品管的吸光度值。 
? 注意：加入的硫酸鈰溶液的量要準確，否則硫酸鈰的褪色速度與碘含量不呈相關性。 
6.結果計算 
根據該反應原理，在反應中碘化物的催化反應速度隨樣品中碘化物含量的增多而加快，在半對數坐標中呈直線，故采用標準曲線回歸法計算、分析結果，并根據樣品吸光度值的對數查出各測定管的碘含量。 
logY=-Bc+logA 
式中： 
logY──測定樣品的吸光度值的對數值 
c ──測定樣品管中的碘含量（由計算器直接得出），μg： 
B ──曲線的斜率 
logA──曲線的截距 
測得樣品管及試劑空白管的碘含量后，根據下式計算樣品中的碘濃度： 
   f·（c-c0）
X = -----------------×100
       M
式中： 
X──測定樣品中的碘濃度，μg/100g； 
c──測定樣品管中的碘含量（由計算器直接得出），μg； 
c0──試劑空白液的碘含量，μg； 
f──稀釋倍數； 
m-樣品質量，g。 
7.注意事項 
（1） 實驗所用的各種玻璃容器，如試管、坩堝、刻度吸管、移液管等要用2 mol/L的鹽酸浸泡2小時，然后再用無碘水進行沖洗。 
（2） 實驗臺及烤箱內壁要定期用硫代硫酸鈉溶液清洗，以便去除殘留在實驗臺表面或烤箱內壁的碘。 
（3） 碘測定實驗臺要相對獨立，盡量和其他實驗臺隔離開，以免造成污染；實驗所用各種容器不要與其他實驗容器混用，以免造成污染。