各國膳食指南均將攝取蔬菜、水果列為重要內容,美國2000年修訂最新版膳食指南,更是將“選擇富含谷物、蔬菜、水果的膳食”這一條改為“每日選擇多種蔬菜與水果”。 蔬菜、水果被如此看重的原因是,它們不僅提供人體所需的一些維生素、礦物質和膳食纖維等,而且尚含有許多植物抗氧化物質,比如一些蔬菜、水果含有豐富的多酚類物質,包括類黃酮、花色素類等,這些物質在體外具有較強的抗氧化活性,有些甚至強于維生素C、E、胡蘿卜素。因此,蔬菜、水果在防治人類一些與自由基損傷相關的疾病以及抗衰老過程中可能起著十分重要的作用。 但是,各種蔬果的抗氧化作用的強弱并不完全相同。找出抗氧化作用比較強的蔬果品種,其意義不言而喻:理論上,可以進一步確認抗氧化作用與防治自由基損傷相關疾病的關系;實踐上,可以進一步研究其有效成分,研發保健食品或藥品,用于疾病預防、延緩衰老等 ——— 增加蔬果的攝入量,可以起到防治心腦血管病、腫瘤及抗衰老的作用。許多體內外試驗證明,這與蔬果的抗氧化作用即清除自由基的作用有關。但是各種蔬果的抗氧化作用的強弱并不完全相同。近年來國內外有較多關于蔬菜、水果抗氧化活性的研究,但是方法、結果不盡一致。比如:國內張佃志等采用黃嘌呤氧化酶法測定了10種蔬菜、4種水果對O 2-•(超氧陰離子)的清除能力,清除能力排序為茄子>豇豆>柿子椒>四季豆>香蕉>土豆>油菜>芹菜>韭菜>蘋果>黃瓜>番茄>桃>葡萄。 潘碧霞等采用類似的方法測定了24種蔬菜、11種水果對O2-•的清除能力,結果表明山楂、蒜頭、柿子作用較強,黃瓜、番茄、綠豆芽最弱。 國外學者采用氧自由基清除能力(oxygenradicalabsorbancecap acity,ORAC法)測定了23種蔬菜、11種水果對ROO•(脂質過氧基)的清除能力,結果表明,蔬菜中大蒜、羽衣甘藍(Kale)、菠菜等作用較強,芹菜、黃瓜的作用最弱;水果中草莓、李子等作用較強,梨、西瓜作用最弱。 本實驗采用鐵離子還原法(ferricreducing/antioxidantpow erassay,FRAP法)對我國常見的66種蔬菜、水果的抗氧化活性進行了測定比較,并且分析了抗氧化活性與維生素C含量的關系。 ■實驗材料 測試所用蔬菜、水果,均購自天津當地市場?! ?6種蔬菜:藕、姜、油菜、豇豆、芋頭、大蒜、菠菜、甜椒、豆角、西蘭花、青毛豆、大蔥、白蘿卜、香菜、胡蘿卜、卷心菜、土豆、韭菜、洋蔥、西紅柿、茄子、黃瓜、菜花、大白菜、豌豆、蘑菇、冬瓜、絲瓜、蒜薹、萵苣、綠豆芽、韭黃、南瓜、芹菜、山藥、生菜。 30種水果:山楂、冬棗、番石榴、獼猴桃、桑葚、草莓、瑪瑙石榴、蘆柑、無籽青皮橘子、橙子、檸檬、櫻桃、龍眼、菠蘿果、紅香蕉蘋果、菠蘿、香蕉、李子、荔枝、金橘、玫瑰葡萄、柚子、芒果、久保桃、杏子、哈密瓜、水晶梨、白蘭瓜、京欣一號西瓜、柿子。 將所有樣品用自來水、蒸餾水反復沖洗干凈后,稱取日常食用部分1~5份,在研缽內按1牶9比例加入蒸餾水,研磨制備勻漿液,1000 0轉/分鐘離心10分鐘后,取上清液按FRAP法測定抗氧化活性,每份樣品重復測定5次。 ■實驗結果 ▲蔬菜水果的抗氧化活性差異很大 36種蔬菜中,抗氧化活性以藕為最強,姜、油菜、豇豆、芋頭、大蒜、菠菜等次之,芹菜、山藥和生菜最弱,最強與最弱之間相差76.0 倍;30種水果中,抗氧化活性以山楂為最強,冬棗、番石榴、獼猴桃、桑葚、草莓、瑪瑙石榴等次之,白蘭瓜、京欣一號西瓜和柿子最弱,最強與最弱之間相差95.9倍。 將本研究結果與上述有關報道進行相關分析,沒有發現明顯的相關關系,原因首先可能是測定方法的不同,另外,蔬果的抗氧化活性可能還受品種、產地、儲存等因素的影響。 ▲抗氧化活性與維生素C含量的關系不盡相同 不同蔬菜中維生素C所占的抗氧化活性差異很大。一些報道稱,蔬菜、水果的抗氧化活性并不與它們的維生素C的含量相關。本實驗也表明,除了甜椒、西蘭花、香菜、卷心菜、冬瓜、南瓜、芹菜、山藥、生菜、荔枝、金橘、白蘭瓜和柿子以外,大多數蔬菜、水果的抗氧化活性來源于維生素C以外的抗氧化成分。 ▲有效成分值得進一步研究開發 本研究中抗氧化活性最強的蔬菜為藕,有關其抗氧化物質的組成目前尚沒有相關報道;山楂為30種水果中抗氧化活性最強的水果,有關報道表明山楂富含黃酮,而且山楂黃酮具有顯著的調節脂質代謝的作用,因此,大多數蔬菜、水果的有效成分值得進一步研究開發。 以前采用高效液相色譜結合電化學檢測的方法測定一些蔬菜、水果中的抗氧化成分,發現抗氧化活性較強的蔬菜、水果含有許多種抗氧化物質,如菠菜、草莓分別含有60~70種抗氧化成分。因此,進一步研究蔬菜、水果的抗氧化物質的本質及其作用,對于研發天然抗氧化物質具有十分重要的意義。 FRAP法 參照Benzie與Strain的方法,原理為Fe3+—三吡啶三吖嗪(tri pyridyl-triazine,TPTZ牞Sigma)可被樣品中的還原物質還原為二價鐵形式,呈現出藍色,并于593nm處具有最大光吸收,根據吸光度的大小可計算出樣品抗氧化活性的強弱。 大致步驟如下:取適量樣品上清液(必要時稀釋),加入1.8毫升TPTZ工作液(由0.3mol/L醋酸鹽緩沖液25ml、10mmol/LTPTZ溶液2.5ml、20mmol/LFeCl3溶液2.5ml組成),混勻后37℃反應10分鐘,測定593nm處吸光度,以1.0mmol/LFeSO4為標準,樣品抗氧化活性(FRAPvalue)以達到同樣吸光度所需的FeSO4的毫摩爾數表示。目前測定抗氧化活性的方法較多,但是,大多數方法是針對某一種自由基的清除活性,從理論上而言,樣品對某種自由基的清除能力不能代表樣品對其他自由基的清除能力或總抗氧化活性。如黃嘌呤氧化酶法僅測定樣品對O2-•的清除能力,而且該法不易標準化;目前國外應用較多的ORAC法,不僅可以用來測定樣品清除ROO、OH等氧自由基的能力,而且還可以自動化、標準化,但是該法的自動化方法需要昂貴的全自動生化分析儀,若手工操作則費時費力,在國內一般實驗室條件下很難推廣應用。 而FRAP法原理明確,操作簡便,易于標準化,測定不需昂貴的儀器。由于它反映的不是針對某一種自由基的清除活性,而是樣品總的還原能力,因此,一些學者認為FRAP法測定的結果,可用來反映樣品總的抗氧化活性。目前FRAP法已經被廣泛應用于測定不同抗氧化物質、食物樣品、生物樣品等的抗氧化活性。 ,
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